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拍打式无菌均质机实验测试@解决方案

发布时间:2023/6/26 9:57:34       阅读人数:214

 拍打式无菌均质机实验测试

无菌均质器又叫拍打式均质器,或无菌均质机。 无菌均质器使从固体样品中提取细菌的过程变得非常简单,只需将样品和稀释液加入到无菌的样品袋中,然后将样品袋放入拍击式均质器中即可完成样品的处理。有效地分离被包含在固体样品内部和表面的微生物均一样品,确保无菌袋中混合全部的样品。处理后的样品溶液可以直接进行取样和分析,没有样品的变化和交叉污染的危险。

1、关于颗粒中药实验

组:将二粒颗粒药在开水中浸泡10分钟,然后连水一起放在均质袋中,另外在外面再套上一个均质袋;

把此两层袋的颗粒置于均质器上拍击,时间两分半,采用8-10次/,均质完毕。

结果:两层均质袋无泄漏。

第二组:将二粒颗粒药在冷水中浸泡10分钟,然后连水一起放在均质袋中,另外在外面再套一个均质袋;

把此两层袋的颗粒置于均质器上拍击,时间3分钟,采用8-10次/,均质完毕。

结果:内袋破,外袋没漏,但表面已起趋(凹凸不平),均质效果比较组因开水浸泡颜色比第二组稍微深一些。

结论:说明冷水浸10分钟,用两个均质袋,即可达到均质的作用。

拍打式均质器

2、用无菌均质器获取大量单个细胞

将手术中切取的肿瘤组织(如胃癌、大肠癌、乳腺癌)放在无菌平皿中,用含有庆大霉素100u/ml的生理盐水洗涤,去除组织上粘附的细菌,洗3次后按2g重量加入10ml生理盐水,用剪刀剪成小块,尽量小些,2-5mm见方均可,装入均质袋中。

用拍打式均质器进行均质,采用7次/5-10分钟,每分钟停1分钟,计算累记分钟,不同组织使用时间稍有不同。再将处理后的组织混合物吸入试管中,静置3-5分钟,取澄清的部分细胞悬浊液,内含大量单个分散细胞,1000转/分离心5分钟,加入含20%小牛血清培养液,可以直接培养,细胞数可以调节在2×105ml左右,总细胞数随组织块大小可以有变化,但培养用细胞足够多。

观察到单个圆形细胞为所需要的被分散的单细胞,包括腺体细胞及上皮类细胞,不规则梭形细胞为打散的肌纤维细胞,也是分散的单细胞,都有完整圆润的细胞形态,活性很好。

原创作者:广州沪瑞明仪器有限公司

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